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IPTG(367-93-1)作活性诱导物质时如何使用

关键词:IPTG;使用;诱导物质

异丙基-β-D-硫代半乳糖苷( 367-93-1),简称IPTG,白色晶体粉末,是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。IPTG作为一种活性诱导物质通常不直接使用,而是要配置成水溶液,再进行相关的处理之后,再进行具体的应用。这样一方面使得IPTG具有更好的稳定性,另一方面也使得其在应用中能均匀接触培养基。IPTG是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。在使用中,首先把IPTG配制成23.83 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100 ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
 
  
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