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含有Tris(77-86-1)结构的缓冲剂总结

2017-10-23
        Bis-Tris, Tricine,TES,TAPS,均为生物化学实验和分子生物学实验中经常使用的缓冲剂,它们的分子结构中都含有Tris的分子结构。那么在使用中这几种缓冲剂与Tris有哪些差异呢?它们各自之间又有哪些相同或不同之处呢?本文将对这几种缓冲剂进行总结。
Tris
Tris
        三羟甲基氨基甲烷(Tris),25°C下的pKa为8.06,缓冲范围7.0~9.0。其常用实验如下:
        在Tris的使用中,需要注意:Tris缓冲液的pH值受温度和浓度影响很大,因此在配制过程中要考虑使用环境;Tris的伯胺基在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,酶,以及DNA,此外,Tris不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定。
Bis-Tris
Bis-Tris
        Bis-Tris,双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷,两性离子缓冲剂,25°C下pKa为6.46,pH缓冲范围为5.8~7.2。其应用领域如下:
(1)作为各种类型电泳的样品缓冲液,凝胶缓冲液和运行缓冲液;
(2)作为阴离子交换色谱法中的缓冲液;
(3)被用于卤代烷烃脱卤酶结晶过程的X射线晶体学研究;
(4)低导电性和高灵敏度,是NMR光谱的有效缓冲液;
(5)与
肝脏型脂肪酸结合蛋白(FAB)相互作用并影响蛋白质动力学。
        Bis-Tris能与Cu2+和Pb2+形成强复合物,与许多常见金属形成弱复合物,因此在含有金属离子的溶液中使用时,应考虑其络合常数。此外,在有压力变化的体系中,可使用Bis-Tris缓冲溶液。Bis-Tris可替代高毒性二甲基胂酸盐缓冲剂,但同样不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定。
Tricine
        三(羟甲基)甲基甘胺酸,是常用于生物化学和分子生物学的两性离子缓冲剂。其25°C下的pKa为8.05,缓冲范围7.4~8.8。应用领域如下:
        Tricine可以结合羟基自由基,形成甲醛,也可以形成三硝基氧自由基,这一点在具有氧化酶活性的酶的存在下应考虑在内。Tricine与许多常见金属形成强复合物,如Mg2+,Ca2+,Ni2+,Co2+,Zn2+和Cu2+,因此在选择该缓冲液时应考虑稳定性常数和浓度。Tricine不适用于二喹啉甲酸(BCA)的测定。
TES
TES
        两性离子缓冲剂,pKa(25 °C)为7.40,缓冲范围6.8~8.2。因为其缓冲范围恰好在生理条件下,因此成为许多生物学家青睐的缓冲液。其常用实验如下:
(1)细胞洗涤缓冲液;
(2)沉淀和提取DNA的溶液;
(3)用于通过凝胶过滤和亲和层析纯化来自猪肾的微粒体;
(4)用于酶测定缓冲液。
        像大多数中性胺基缓冲液一样,TES可与DNA形成复合物;其限制酶动力学的能力比HEPES强,但比Tris弱;TES与常见金属如Cr3+和Fe3+形成强复合物,与Co2+,Ni2+,Cu2+和Zn2+形成弱复合物。TES适用于二喹啉甲酸(BCA)测定.
TAPS
TAPS
        三羟甲基甲胺基丙磺酸,两性离子缓冲剂,pKa(25°C)为8.40,缓冲范围7.7~9.1。其应用范围如下:
        TAPS与Cr3+,Fe3+和Cu2+形成强复合物,与其他常见金属形成弱复合物,因此在选择该缓冲液时应考虑稳定性常数和浓度。
        在具体使用中,含有Tris结构的缓冲液与多种金属离子会形成或强或弱的复合物,因此在使用中应将稳定常数考虑在内。此外,还要考虑缓冲范围以及适合的实验类型,才能取得最佳的实验结果。
相关链接:Tris
                    Bis-Tris
                    Tricine
                    TES
                    TAPS
本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑