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ADA(26239-55-4)缓冲液应用于胺碘酮和去乙胺碘酮的测定

N-(2-乙酰胺基)-2-亚氨基二乙酸(ADA)是Good’s缓冲剂家族的一员,pH缓冲范围6.0-7.2ADA不溶于水,在强碱作用下可溶于水,其和多种金属离子,如锰离子、镍离子等,形成稳定性较强的复合物。ADA缓冲液可应用于蛋白质结晶的溶液,电泳缓冲液等。下面我们介绍下ADA缓冲液用于毛细管电泳法分离和测定胺碘酮和去乙胺碘酮[1]

胺碘酮是一种抗心律失常药,用于治疗室上性和室性心律失常。它被广泛认为是治疗与Wolff-Parkinson-White综合征有关的心动过速的首选药物。胺碘酮经由N-去乙基化被代谢,在长期服药患者体内检测到去乙基化的代谢物。由于胺碘酮在血浆中的治疗浓度在0.5-2.0 ug/ml,因此针对每个个体胺碘酮和去乙胺碘酮的测定必须要防止毒性积聚且能发现最大疗效。Pérez-Ruiz等人[1]采用MEKC毛细管电泳方法来分离和测定胺碘酮及它的代谢物。

在电泳法中,电泳溶液的pH值对电泳的选择性有重要影响,pH值会影响到毛细管的电渗流及被分析物的分离度,最终影响电泳率。pH < 5,胺碘酮及其代谢物完全质子化,导致不能被分离;pH >5时,这两个化合物呈现疏水性,需要选用有机溶剂。

在电泳缓冲液选择方面, Pérez-Ruiz等人研究了五种不同的缓冲剂,分别是磷酸盐,硼酸盐,ADAMESHEPES,比较了它们在 15 mMpH=67情况下,分离胺碘酮及以代谢物的能力。结果表明ADA缓冲液呈现最佳的分辨率。进一步研究ADA缓冲液,不同pH下分离能力实验发现pH值为7.5时,分辨率最佳。

relation between mobility and pH value

针对胺碘酮及其代谢物的分离和测定,上述研究表明MEKC分析法中,能达到最佳分别率的电泳缓冲液是15 mM ADA缓冲液(pH=7.5)。

参考文献:

[1] Pérez-Ruiz et al. Chromatographia, 2002, 56, 63-67.

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本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑