结构搜索

    全站搜索

    在线客服

  •  诊断医药客服  新材料客服

    当前位置: 专题聚焦

免疫诊断试剂制备的特点

2020-01-17 来源:亚科官网

免疫诊断试剂是诊断试剂中品种最多的,在临床诊断领域应用十分广泛,主要用于传染性疾病检测、内分泌检测、肿瘤检测、孕检等,也可用于药物检测免疫诊断试剂生产采用的工艺包括反应板或固相载体的选择、抗原抗体的筛选、标记物的筛选标记、显色剂及示踪剂等溶液的配制、校准品的配制与校准等环节,每个环节具有不同的特点及注意事项,接下来小编将以癌胚抗原(CEA)酶联免疫法为例予以说明。

酶联免疫法的核心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测,所以固相载体、抗原抗体及显色剂的选择尤为重要。聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等物质都可作为固相载体,形式通常为凹孔平板、试管、珠粒等。

关于校准品的配制利用小牛血清作为基质来配制校准品。即向小牛血清中加入CEA抗原,配制不同浓度梯度的系列校准品。需要注意的是,校准品的配制要参考CEA的人群分布浓度及不同原理的线性范围,另外,校准品的调试与定值需要通过试验反复进行。

其次,关于标记物(酶标记抗体)要选择适宜的标记底物,还要注意标记浓度。以不同的CEA抗体做HRP(辣根过氧化物酶)标记并进行免疫分析,比较各种标记物零标准的OD(光密度)值、标准曲线形状,择优选择抗体为标记底物。制备标记物时,HRP与CEA的量采用不同的重量比,分别建立标准曲线进行比较,并筛选标记物质量较佳的标记条件。分析中,标记物相对于抗原所需是过量的,需通过耐量试验选择适宜浓度。

对于显色剂的选择,要求价廉、安全、有明显的显色反应且本身无色。TMB和ABTS是当前应用普遍且效果好的酶免显色底物。TMB具有高灵敏度,高稳定性、安全性等优点,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样品中人癌胚抗原浓度。ABTS用于酶联免疫实验,产生一种可溶性的显绿色的螯合物,可使用405 nm光谱读取OD值,可使用1%SDS终止反应。

相关链接:TMB

    ABTS

 

 



苏州地址:苏州工业园区方洲路128号 邮编:215125
电话:0512-87182055 邮箱:sales@yacoo.com.cn
宿迁地址:宿迁市宿豫区电商产业园谷客大厦(A9栋)一楼 邮编:223801
山东地址:山东济宁市新材料产业园区 邮编:272211
安徽地址:安徽安庆市安庆高新区皇冠路8号 邮编:246005
海外公司名称: Yacoo Science America LLC
海外地址:14 Cypress Bayou Court, Spring, TX 77382
© 2010 苏州亚科科技股份有限公司[苏ICP备15045967号]
亚科信息管理平台   用户登录   站内地图