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异硫氰酸胍|593-84-0|助力从动物内脏提取核苷酸和多肽

2020-09-17 来源:亚科官网

异硫氰酸胍|593-84-0|是一种强用力的蛋白质变性剂,外观为白色结晶性粉末,有刺激性,对光敏感,溶于乙醇和水,熔点118℃。异硫氰酸胍主要用于变性裂解细胞和提取RNA和DNA,是常见的核酸提取用化学组分。

 

专利CN111500664A公开了一种使用异硫氰酸胍从动物内脏提取核苷酸和多肽的方法,核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物,其广泛应用在医药、母婴制品、调味品和食品添加剂中。多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,是蛋白质水解的中间产物,涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域,其重要性在于调节体内各个系统和细胞的生理功能,激活体内有关酶系,促进中间代谢膜的通透性,或通过控制DNA转录或影响特异的蛋白合成,最终产生特定的生理效应。

 

动物内脏中含有丰富的核苷酸和多肽,但是目前对核苷酸和多肽的提取大多是分开进行的,造成资源的浪费现象和工序的复杂,异硫氰酸胍有助于从动物内脏提取核苷酸和多肽。其具体方法如下:

首先取新鲜动物内脏洗净,沥干,切碎后再捣碎,加入去离子水,得到混合溶液,然后向混合溶液中加入异硫氰酸胍溶液,振动混匀后静置。接着再向其中加入含有二氧化硅的载体,这是因为异硫氰酸胍会使细胞裂解,而细胞中释放出的核苷酸将结合在二氧化硅载体上,将含有二氧化硅的载体取出,对其使用洗脱液进行吸脱、分离,就可以得到纯化的核苷酸。

然后向已取出二氧化硅载体的余液中加入NaCl溶液,将混合液浸提,再加入复合蛋白酶,然后进行微波酶解,再将酶解液水浴加热后,进行离心,取上层清液,冷冻干燥后即得多肽。

这种方法利用了异硫氰酸胍能够破坏细胞结构,使蛋白变性的特性,不仅可以对核苷酸和多肽先后进行提取的方法,而且方法简便,效率高,同时还避免了加入生化试剂提取时造成相互生化试剂之间产生反应的问题。

相关链接:异硫氰酸胍