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化学发光免疫技术
化学发光免疫技术:集灵敏的化学发光分析和特异的抗原抗体免疫测定于一体的检测技术。
特点:特异性高、敏感性高、分离简便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化。
按发光剂不同分为
1.发光酶免疫测定(CLEIA)
chemiluminescence enzymeimmunoasssay
2.化学发光免疫测定技术(CLIA)
chemiluminescence immunoassay
3.电化学发光免疫测定技术(ECLI)
electrochemiluminescence immunoassay
按分离方法不同分
1.微粒子化学发光免疫测定
2.磁颗粒化学发光免疫测定
发光与化学发光剂
发光
一种物质由电子激发态回复到基态时,释放出的能量表现为光的发射。
光照发光:
发光剂经短波长入射光照射后进入激发态,当回复至基态时发出较长波长的可见光。
生物发光:
反应底物在荧光素酶的催化下利用ATP产能,生成激发态的氧化荧光素,后者在回复到基态时多余的能量以光子形式放出。
化学发光:
在常温下由化学反应产生的光的发射。化学发光是一个多步骤的过程。
化学发光剂
机制:
某些化合物可以利用化学反应产生的能量使其产物分子或反应中间态分子上升至电子激发态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时,以发射光子的形式释放能量(即发光)。
化学发光剂或发光底物:
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物。发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂
化学发光剂应符合以下几个条件
①能参与化学发光反应;
②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂;
③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力;
④应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫活性。