化学发光免疫分析法、分类以及应用研究

近年来，化学发光免疫分析方法由于其具有灵敏度高、特异性强、适用面广、所需设备简单、线性范围较宽等优点，日益受到人们的青睐，在生命科学、临床医学以及环境、食品、药物等领域得到广泛应用。化学发光免疫分析是将高灵敏的化学发光检测与高特异性的免疫反应相结合，用于检测各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的分析技术。

化学发光免疫分析法

化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或定性检测。化学发光免疫分析中使用最多的4类标记物为鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物，吖啶酯衍生物，过氧化物酶和碱性磷酸酶。

化学发光免疫分析的分类

根据化学发光所用的标记物和发光原理的不同，一般可分为3类：直接化学发光免疫分析、酶促化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。不同于前两者，电化学发光由电启动电极表面的电化学发光剂发生电化学反应产生光信号，常需要共反应剂提高发光效率，如三丙胺（tripropylamine，TPA）作为三联吡啶钌（［Rb（bpy）3］2＋）的电子供体共反应剂。常用的发光体系有：吖啶酯类、鲁米诺类（luminol）、三联吡啶钌类、过氧化草酸酯类（TCPO、DNPO）和强氧化剂高锰酸钾、Ce（SO4）2等（见表1）。有些发光剂与氧化剂反应缓慢，还需要催化剂和增强剂的作用，提高发光强度和稳定性。

化学发光免疫分析法的应用

化学发光免疫分析方法既具有化学发光分析的高灵敏性，又具有免疫反应的高度特异性。在临床诊断、食品安全及环境监测等领域有广泛的应用和发展前景。

1、快速化学发光免疫分析方法

传统的免疫分析方法常常需要数小时才能完成，长的温育时间还导致免疫试剂在管道内壁的吸附，增加了不同测定之间的信号交叉，因而限制了样品的检测通量和免疫分析方法的应用价值。为了克服这些不足并实现免疫分析的高通量，可通过外场驱动或对溶液进行有效混合策略加快抗原、抗体等生物大分子的传质速率，或提高反应体系的温度来加速免疫反应的动力学，从而实现快速免疫检测。

2、多组分化学发光免疫分析方法

在单个分析流程中同时实现多组分的检测，具有分析通量高、所需时间短、样品消耗少、分析成本低等突出优点，是免疫分析长期追求的目标，也是近年来免疫分析的研究热点。

3、高灵敏化学发光免疫分析方法

在实际检测中，现有的检测手段灵敏度和特异性不够理想，高灵敏高选择性的检测方法越来越显示出其重要性。纳米技术的发展为高灵敏化学发光免疫分析方法的发展提供了契机，纳米粒子在生物标记分析得到了广泛应用，已有多种信号放大方法用于高灵敏免疫分析方法的构建。

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