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Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液究竟有何区别
2019-03-29
来源：亚科官网
在生物实验中经常会用到缓冲液，缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。最常用到的缓冲液有很多，比如说磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液以及氨基酸缓冲液等等。不同的缓冲液差别液很大，今天就来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的区别。
Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液优缺点
1、Tris-HCl缓冲液
Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。
1）Tris-HCl缓冲液优点
碱性较强，可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液；对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
2）Tris-HCl缓冲液缺点
pH受浓度影响较大，稀释10倍，pH变化大于0.1
温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.4
2、HEPES缓冲液
HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
1）HEPES缓冲液优点：
在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值，并对细胞无毒性作用。
2）HEPES缓冲液缺点：
在高浓度时对一些细胞可能有毒，与其他缓冲剂相比价格略贵。
Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的应用
1、Tris-HCl缓冲液
Tris是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一，其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH。此外，Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。作为蛋白缓冲液时，若后续工作需要质谱，则不适宜用Tris，最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
2、HEPES缓冲液
HEPES缓冲液对细胞无毒性作用，它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。
相关链接：Tris-HCl
本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑
