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血细胞分析仪堵孔与所用试剂有什么关系?
2018-12-04
来源:转载自第三方
血细胞分析仪主要用于血细胞数量的测量、血红蛋白浓度测定以及白细胞分类,并通过计算给出各细胞相关参数,是临床检验科室使用率最高的常规设备之一。其在实验中最常发生的问题是堵孔,造成这个问题的原因都有哪些呢?与所用试剂有什么关系呢?
血细胞分析仪的原理
血细胞分析仪通常采用的是库尔特原理,即在计数管内外各放置一支铂金电极,两电极间施加一个恒定的电流,测试时先将待测血液用洁净的电解液充分稀释,使血细胞在电解液中成为游散状态,然后在计数管上端施以负压,利用血细胞经过计数管宝石孔时的电阻改变而获得电脉冲,脉冲数代表血细胞个数,从而达到计数的目的。
血球试剂是与血液细胞分析仪相配套使用,供临床检测血细胞计数、血红蛋白含量和血细胞分类等,属于医疗器械范畴下的体外诊断试剂,包括稀释液,溶血剂,清洗液,以及抗凝剂。它们又与堵孔问题有什么关系呢?
分析试剂为什么会造成堵孔问题?
1. 稀释液
稀释液通常是一类具有酸碱缓冲作用(常用缓冲剂包括ADA、TRIS、HEPES、咪唑等)、适当的离子强度和电导率的等渗溶液,能在一定时间内完整的保持血细胞原来的体积,并获得与细胞体积相应的脉冲大小。
进行血细胞分析前,清洗液与稀释液相互配合将仪器检测单元的容器与管道清洗干净,以此来降低仪器的背景值,避免前一检测样本对本次检测的干扰。如果稀释液的理化指标不合格,造成细胞无法正确稀释间隔,游离不好就会造成细胞聚集,容易造成堵孔问题。
2. 溶血剂
被稀释的血液加入溶血剂后,红细胞溶解,释放血红蛋白,后者与溶血剂中相关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白检测系统,在特定波长下比色,吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成正比,仪器便可显示其浓度;同时,不同类型的白细胞经溶血剂作用后形成明显的差异,仪器可以根据这些差异对白细胞总数及各类群的数量进行统计。如果溶血不足,溶血剂破坏红细胞不完全或者红细胞碎片发生粘连聚集,就会在小孔上附着,这种情况持续长时间,小孔上附着的细胞碎片以及蛋白沉积就会越积越厚,最后堵塞小孔。
3. 清洗液
清洗液的组成一般包括优质的两性表面活性剂、动物水解蛋白酶、防腐剂、甲酸钠、氯化钠、缓冲剂如ADA、TRIS、HEPES、咪唑等。
清洗液的主要作用就是清洗仪器管路中血液和血液留下各种蛋白,降低血液的交叉污染,保证结果的可靠性和准确性,并提供足够湿润的环境,以便迅速的从整个流量系统中赶走气泡。如果清洗剂效果不好就起不到应有的作用,势必造成久后堵孔。同时,清洗剂除了质量对清洗结果有影响以外,清洗的方法也会对结果产生影响,应做到每日清洗,每周及月保养,做到开机检测则必须清洗,检测结果才能更准确,仪器才能更加长寿。
4. 抗凝剂
国际学标准化委员会已经推荐在血细胞计数及筛分时使用K2EDTA作为血标本所选抗凝剂。其造成堵孔有以下几个原因:抗凝比例过高:导致卫星现象,显微镜下能看到大细胞的周围卫星很多小细胞,造成细胞体积巨大而且还很难溶解,容易造成堵孔;放置时间过短:EDTA与血小板凝血因子反应结合需要时间,其随着温度的升高而缩短,结合不好也容易出现问题。
血液分析仪将技术人员从原始的人工计数方式解放出来,同时也使得检测结果更加精确、更有效率,重复性更好,需血量更少,大大促进了血液学检验技术的发展并为临床医学提供了更多的诊断信息。通过对实验中细节的注重,希望提高仪器的使用寿命以及检测的准确度,更好的服务于患者。
本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑
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