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影响新冠病毒IgM/IgG检测的外源性干扰物质有哪些?
新冠病毒的抗体的检测作为核酸检测的补充,可以有效提高新冠肺炎诊断的准确率,在新冠肺炎的诊治和防控中发挥重要作用。抗体检测试剂是基于抗原与抗体特异性结合的免疫学原理,常用的方法学主要有胶体金法,免疫荧光层析法、酶联免疫法和化学发光法。优质的试剂原料BSA、EDC-HCL、TMB、NBT、鲁米诺、AMPPD、吖啶酯等对抗体检测具有重要价值。
新冠病毒的抗体检测也存在假阳性的情况,导致其出现假阳性主要有两个原因,一是试剂盒阳性判断值(Cut-off value)的设定,二是患者标本中内源性或外源性干扰物质的影响。本文将介绍影响新冠病毒IgM/IgG检测的外源性干扰物质。
影响新冠病毒IgM/IgG检测结果的外源性干扰物质包括标本溶血、标本贮存时间过长和标本凝固不全等。
标本溶血
标本溶血是临床实验室最常见的误差来源,临床实践和相关文献证明溶血的发生和样本收集过程有直接的关系,在临检过程中如果采血针口径过小、抽血速度过快、采血点选择不当、止血带使用过久、采血管未充满、采血后过度混摇、运输过程中过度震荡等,都会造成溶血。
标本溶血之所以会造成抗体检测假阳性是因为,血红蛋白的血红素基团有类似过氧化物的活性,在以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶的酶联免疫测定和化学发光免疫分析中,如果血清标本中血红蛋白浓度较高,则其在温育过程中会吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物如TMB、鲁米诺等反应显色或发光,导致假阳性。
标本贮存时间过长
如果标本在2~8℃下保存时间过长,IgG可聚合成多聚体,在间接法免疫测定中导致本底过深,甚至造成假阳性。
标本凝固不全
标本凝固不全的情况下进行离心分离血清,是干扰抗体检测结果假阳性的另一因素。因为,血液没有完全凝固,离出的“血清”并非为完全的血清,其中仍残留部分纤维蛋白原,如将其加入微孔中,在ELISA测定过程中仍可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果。
相关链接:BSA、EDC-HCL、TMB、NBT、鲁米诺、AMPPD、吖啶酯
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