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DTT|CAS:3483-12-3|在核酸提取中的应用

2022-05-13 来源:转载自第三方

二硫苏糖醇(化学名:DL-二硫苏糖醇,简称:DTT)是一种小分子有机还原剂。DTT主要应用在核酸提取/保护、IVD试剂盒、蛋白质中二硫键的还原、化学镀镍等领域。本周亚科股份小编介绍一下DTT在核酸提取中的应用。

核酸可分为DNA和RNA,核酸在生物体内是能够稳定存在的,但是离体后由于核酸酶的释放,很容易引起核酸降解,随着现代医学技术的进步,分子疾病诊断应用的越来越多,核酸提取以及保存的需求也越来越大。因此保证临床样品的稳定尤为关键。目前比较常用的方法是使用高浓度的超离序盐,如异硫氰酸胍、尿素等作为核酸酶的稳定剂。而胍盐作为有毒化学品,特别是盐酸胍与异硫氰酸胍,生产的厂家较少。因此,发明一种不含胍盐或含胍盐量低的生物样品核酸保护液显得十分必要。

CN112280775A专利中提供了一种核酸保护液,具体由5部分组成:核酸酶抑制剂(尿素或异硫氰酸胍)、表面活性剂(十二烷基肌氨酸钠、3-磺丙基十四烷基二甲基甜菜碱或曲拉通X-100)、渗透剂(硫酸铵、氯化铵或硫酸铝铵)、螯合剂(柠檬酸钠、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾)、还原剂(DTT、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾)。

专利中核酸保护液优选方案为:尿素60g/L、异硫氰酸胍60g/L、曲拉通X-100 3g/L、乙二胺四乙酸6g/L、硫酸铵70g/L、硫酸铝铵30g/L、DTT 5g/L、柠檬酸钠5g/L和余量的水。

本发明通过各成分的协同作用,能够防止生物样品中的核酸降解,该生物样品核酸保护液中含有少量或不含胍盐,既减少了保护液的毒性,也避免了因市面上胍盐产量少影响生产的问题。


参考文献

CN112280775A   一种生物样品核酸保护液及应用


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