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Cell:加州理工学院建立首个全身透明小鼠
2014-08-09
来源：转载自第三方
由于脂肪的存在，厚组织都是不透光的。要进行成像就得把组织切得特别薄，问题是这样就无法获得组织的3D结构。近年来出现了一些通过去除脂肪让组织变透明的方法，不过这些方法大多需要在组织透明化之前，构建和表达发荧光的目标蛋白。随后，斯坦福大学的Karl Deisseroth开发出CLARITY技术，该技术允许人们在组织透明化之后，使用标记抗体或核酸探针，大大拓展了组织透明化的应用。不过CLARITY处理组织仍有大小限制，Deisseroth说。
在本研究中，文章的资深作者Viviana Gradinar将自己的全身组织透明化技术称为PARS(perfusion assisted agent release in situ)。该技术在CLARITY技术的基础上，将透明剂持续泵入动物的循环系统(或者通过脑脊液管道泵入大脑)，让试剂逐渐进入组织。Gradinaru等人利用PARS建立了几乎完全透明的小鼠和小鼠器官，并用荧光抗体在其中揭示不同的细胞和结构。
“这是一次重要的技术进步，”麻省大学的Guangping Gao教授评论道，他的研究方向是开发腺病毒相关载体用于基因治疗。“可以为我们揭示病毒如何穿过血管进入细胞，以及宿主如何与病毒载体相互作用。”
Gradinaru指出，PARS特别适合用来观察机体中的长神经元。“这一方法可以帮助人们定位周围神经系统，”她说。
PARS可以同时定位DNA、RNA和蛋白，“但仍然受到抗体扩散能力的限制，”Gradinaru说。因此在使用这一技术时，最好使用纳米抗体等较小的标记。另外，数据处理也是PARS面临的一大挑战。
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