PLoS Biology | 30秒内完成！一种简单、快速、高效的核酸提取方法

本文转自 PlantReports
核酸提取是各种分子生物学实验中所必需的一个技术，然而核酸的提取通常需要繁琐的步骤，并且需要一定的仪器设备。开发一种简单、快速和高效的核酸提取方法可以极大的节省人力、物力和财力。

来自澳大利亚昆士兰大学植物遗传工程实验室的研究人员在PLoS Biology上发表了一篇题为 Nucleic acid purification from plants, animals and microbes in under 30 seconds 的论文。在该研究中，科研人员开发了一种新的核酸提取方法，利用滤纸可以在30秒内从植物、动物和微生物中快速的完成核酸的提取和纯化，而且成本非常低（每个样品的成本可低至0.06美元）。

该方法用到的材料是Whatman No.1滤纸 (GE Healthcare, USA)，研究者在论文中提到也可以用其它滤纸。经过一系列的实验，研究人员证明滤纸可以有效的纯化DNA。

滤纸（cellulose-based paper）可用来提取和纯化DNA

随后，研究者将滤纸处理制作成更易于操作的试纸条。将Whatman No.1滤纸的一半浸泡在熔化的蜡中（Paraplast Plus, Fluka），浸过蜡的滤纸可以防水，产生一个疏水区域。然后将滤纸裁成44 mm的长方形，其中40 mm有蜡覆盖，而4 mm没有经过蜡处理，随后把这个长方形条切割成宽大约2毫米的试纸条，这样每根试纸条上具有一个核酸结合区（实际上就是没有蜡的滤纸）和一个手柄（就是泡过蜡，疏水并且好拿）。

制作的试纸条

具体的提取过程如下（以植物叶片为例）：
1. 将叶片浸入到含有500 μL裂解液（20 mM Tris [pH 8.0], 25 mM NaCl, 2.5 mM EDTA, 0.05% SDS）和合金珠的试管中。
2. 将试纸条浸入到粗提液中以结合核酸，大约3秒。
3. 将试纸条浸入到清洗液中（10 mM Tris [pH 8.0], 0.1% Tween-20），去掉杂质，大约3秒。
4. 最后把试纸条浸入到扩增反应液中，将核酸洗脱下来，大约3秒。
5. 洗脱液可以直接作为PCR扩增的模板。

利用试纸条提取核酸的流程

该技术可用实现在没有专业设备或人员的情形下在短短30秒内提取DNA和RNA，消除了对用于样品制备的专业实验室的需求，而且比任何现存的其他技术更加简单、更加快速和更加便宜。