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蛋白酶K在什么温度下酶活性最大？需要多长时间？加多少量合适？
2014-08-14
来源：亚科官网
亚科科技股份疑问解答
问：蛋白酶K在什么温度下酶活性最大？需要多长时间？加多少量合适？
答：蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。
蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。
在较广的pH范围内（pH 4-12.5）均有活性。
推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。
孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时
