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化学发光分类简述

2015-07-27 来源：亚科官网

关键词：化学发光；吖啶酯；鲁米诺；AMPPD

化学发光按原理可分为生物发光与化学试剂发光，化学试剂发光又可分为直接化学发光，间接化学发光。

生物发光（bioluminescence）是指生物体发光或生物体提取物在实验室中发光的现象。它不依赖于有机体对光的吸收，而是一种特殊类型的化学发光，化学能转变为光能的效率几乎为100%。也是氧化发光的一种。

直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需酶的催化作用，直接参与发光反应，它们在化学结构上有产生发光的特有基团。吖啶酯便是直接发光试剂中应用最广泛的试剂。如果吖啶环上的C-9碳原子链上取代基且该取代基能与吖啶环上的C-9和H2O2 形成有张力的不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N-甲基吖啶酮，当回到基态时发出光子，则这类取代吖啶化合物可做为化学发光标记物。常用作化学发光标记物的吖啶取代物分为两类：一类为吖啶酯；另一类为吖啶磺酰胺。

三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+，其是电化学发光剂，它和电子供体三丙胺（TPA）在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。这类化合物的应用较少，在此便不多做介绍了。

间接化学发光也有叫做酶促反应发光剂的，是利用标记酶的催化作用，使发光剂（底物）发光，这一类需酶催化后发光的发光剂。鲁米诺（luminol）、异鲁米诺（isoluminol）及其衍生物作为化学发光物质最早被用作标记物，这类物质的发光为氧化反应发光，它们在碱性条件下通过辣根过氧化物酶（HRP）催化，被H2O2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子。

（金钢烷）- 1,2- 二氧乙烷及其衍生物说起来比较陌生，但其有个很有名的代表化合物AMPPD，AMPPD在碱性磷酸酶（AP）作用下磷酸酯基发生水解，脱去一个磷酸基而得到一个中等稳定的中间体AMPPD- （半衰期2-30min），此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金钢烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子，当回到基态时发出波长为470nm的光，并可持续几十分钟。