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噻唑蓝|298-93-1|比色法应用概述
噻唑蓝(MTT)法是一种检测细胞存活和生长的方法,广泛应用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。MTT法应用的一些具体应用如下所示:
(1)MTT法可用于检测变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌等常见细菌的活菌数量,具有快速、方便等优点。MTT法在测量变异链球菌时,最佳的检测波长为510 nm,最佳的测定细菌范围是1.5×105~1.0×107CFU·mL-1。MTT法在测量血链球菌时,最佳的检测波长为545 nm,最佳的测定细菌范围是1.5×105~2.0×107CFU·mL-1。MTT法在测量伴放线菌嗜血菌时,最佳的检测波长为557 nm,最佳的测定细菌范围是1.0×106~5.0×107CFU·mL-1。
(2)MTT法测定香菇多糖对人前列腺癌细胞PC-3、人肺癌细胞A-549、人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K-562的细胞毒作用。结果显示香菇多糖对人前列腺癌细胞PC-3、人肺癌细胞A-549、人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K-562的半数抑制浓度(IC50)值分别为(25.8±3.4),(90.0±7.8),(63.3±4.2),(33.1±3.3) μg·mL-1,生长曲线显示香菇多糖100μg· mL-1对PC-3细胞及HepG2细胞的抑制率随着时间增加而增强,表现出一定的时-效关系。
(3)MMT法测定待移植睾丸细胞的活性。采用大鼠睾丸制备的Leydig细胞悬液,与MTT基质液共同温育后,以异丙醇溶解MTT甲臜,上清液于563 nm测吸光度;用体外细胞培养和睾酮释放量评价方法的可靠性,与台盼蓝染色法对照。结果显示基质浓度1 g/L,温育时间3小时,异丙醇作溶剂为反应最佳条件。细胞培养和睾酮测定表明MTT法较台盼蓝染色法灵敏、准确。
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本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑