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DTT的性质及用途
2012-08-09
来源:亚科官网
中文品名:1.4-二硫代苏糖醇
英文名称:DL-Dithiothreitol
性质:DTT是一种强还原剂,有抗氧化作用。为白色粉末,熔点42~44℃,沸点125~130℃(0.27kPa),37℃,0.67Pa时升华,微吸潮,易溶于水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿和乙醚,在空气中缓慢氧化;以1,4-丁二烯为原料,经溴化、氧化、乙酰化后与硫代乙酸钾反应后经甲醇氯化氢溶液水解而得。它能保护酶分子上的还原性基团,维持还原性环境,稳定酶的活性,是一种蛋白质胶联剂。常用作蛋白质巯基保护剂。
用途:DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA的二聚化。
DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂,如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS)。反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。
注意事项:由于容易被空气氧化,因此DTT的稳定性较差;但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低,随着pH值的降低,DTT的有效还原性也随之降低,因此应控制体系的pH值。
保存:2-8°C冷藏保存。密封包装,避免潮湿、加热和阳光直晒的环境。