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抗体稀释液和ELISA相关溶液的配制
2010-09-29
来源:亚科官网
1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
NaH2PO4·2H2O | 0.39克 |
Na2HPO4 | 1.27克 |
NaCl | 0.85克 |
NaN3 | 200mg |
H2O(蒸馏水) | 至 1000ml |
NaCl | 2.0克 |
KH2PO4 | 0.2克 |
Na2HPO4·12H2O | 2.9克 |
KCl | 0.2克 |
NaN3 | 0.2克 |
H2O | 至 1000ml |
吐温(Tween)20 | 0.5ml |
4°C保存备用 |
Na2CO3 | 1.59克 |
NaHCO3 | 2.93克 |
NaN3 | 0.2克 |
H2O | 至 1000ml |
密封盖好,4°C存放备用 |
磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.0 | |
0.1mol/L柠檬酸(21.014克/100ml) | 24.3ml |
0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml) | 25.7ml |
H2O | 50ml |
4°C存放备用 |
0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL | |
Tris | 6.05克 |
HCL(36%) | 3.15克(约2.7ml浓HCL) |
H2O | 至 1000ml |
DAB为3´,3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色 |
称DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。
7、3´,3´,5´,5´,-四甲基联苯胺(TMB)溶液配制:
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用。使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%的H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
8、1%离子琼脂胶配制液
作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
0.05UpH8.6巴比妥钠-HCL缓冲液
巴比妥钠 | 23.8克 |
1mol/L HCL | 34.5ml |
H2O | 2150ml |