肟类化合物水解碘化乙酰硫代胆碱（1866-15-5）及对乙酰胆碱酯酶恢复作用研究

     该论文系统研究了：1)三种肟类化合物(氯解磷定(Pralidoxime Chloride，2-PAM-Cl)，双磷定(Trimedoxime，TMB4)和双复磷(Obidoxime Chloride，LUH₆))的非经典功能—水解乙酰胆碱(碘化乙酰硫代胆碱(acetylthiocholine iodide，ATCh)和碘化乙酰胆碱(acetylcholine iodide))；2)三种肟类化合物(2-PAM-Cl，TMB₄和LUH₆)的经典功能—对中毒乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase，AChE)的恢复作用；3)中毒AChE的恢复和老化性质。 结果表明：

 1．三种肟类化合物的非经典功能—水解乙酰胆碱能力比较

 （1）三种肟类化合物均能明显的水解ATCh，并且水解能力随着温度，pH值和反应时间的升高而增强。以肟类化合物TMB₄水浴孵温30℃条件为例：随着pH值由7.0到8.0，反应2h后的OD₄₁₂也分别0.90和2.08。同样当反应温度的升高水解能力增强。例如反应温度为5℃，15℃，30℃，37℃和40℃，反应2h后的OD₄₁₂也分别为0.028，0.29，0.90，0.94和1.067。

 （2）当pH≤6.2时，三种肟类化合物对ATCh仅有微弱水解，并且随着温度和pH值的增加水解的增幅也较小。水解能力较强的TMB₄在水浴孵温37℃反应4h时的OD₄₁₂也仅为0.29，LUH₆的仅为0.20；相反当pH≥7.0时，三种肟类化合物对ATCh水解明显，并且随着温度和pH值的增加水解的增幅也较大。

（3） 三种肟类化合物对ATCh的水解能力随着肟类化合物终浓度的升高而增强。如pH为7.0，ATCh终浓度为0.6mmol/L，反应温度为30℃，当2-PAM-Cl终浓度依次为0.001，0.01，0.05，0.1，0.2和0.5 mmol/L时，反应20min后的OD₄₁₂分别0.0013，0.0057，0.0387，0.1037，0.2313和0.6083。

 （4）三种肟类化合物对ATCh的水解能力随着ATCh浓度的升高而增强。如pH为7.0，2-PAM-Cl终浓度为0.05mmol/L，反应温度为30℃，当ATCh终浓度依次为0.006，0.06，0.12和0.6mmol/L时，反应20min后的OD₄₁₂也分别0.00，0.0023，0.0100和0.0670。

（5）以上的实验均采用微量DTNB显色法测定三种肟类化合物对ATCh的水解能力，实验结果均显示在相同条件下TMB₄和LUH₆的水解能力比2-PAM-Cl强。如2-PAM-Cl，TMB₄和LUH₆在pH为7.0，温度30℃反应4h后的OD₄₁₂分别为0.2715，1.4487和1.436。

 （6）利用Michel法比较研究了三种肟类化合物在pH为8.0的巴比妥钠-KH₂PO₄-NaCl缓冲液中对碘化乙酰硫代胆碱(acetylthiocholine iodide，ATCh)和碘化乙酰胆碱(acetylcholine iodide)的水解能力。结果显示：三种肟类化合物均能够水解ATCh，但均不能水解碘化乙酰胆碱；在相同条件下2-PAM-Cl的水解能力比TMB₄和LUH₆强。在水浴孵温25℃ 2-PAM-Cl、TMB₄和LUH₆与ATCh反应1h后缓冲液pH值降低量依次为0.8625，0.582和0.678；但是3种肟类化合物与碘化乙酰胆碱反应后的pH值降低量依次为0.0158、0.0584和0.0299，实际接近0。

2．辛硫磷对几种生物AChE的抑制中浓度(I₅₀)的测定 辛硫磷对番鸭脑AChE的I₅₀最高为9×10^-4，其次为对家兔脑AChE的2.4×10^-4，对小菜蛾AChE和鲫鱼脑AChE的I₅₀均为1.8×10^-4，对菜蛾绒茧蜂AChE的I₅₀与对蟑螂头部AChE的基本一致，分别为4.0×10^-5和4.2×10^-5，对家蝇头部AChE的I₅₀最低，仅为6×10^-6。

3．以I₅₀剂量的辛硫磷抑制几种生物AChE分别测定其老化常数 用肟类化合物TMB₄分别测得I₅₀剂量的辛硫磷抑制的小菜蛾AChE、蟑螂头部AChE和家兔脑AChE的老化常数分别为0.0129，0.0111和0.0173；老化时间t_0.5分别为53.7h，62.4h和40.06h；t_0.99分别为357h，414.9h和266.2h。用肟类化合物LUH₆分别测得I₅₀剂量的辛硫磷抑制的菜蛾绒茧蜂AChE和鲫鱼脑AChE老化常数依次为0.0143和0.0105；老化时间t_0.5分别为48.5h和66h；t_0.99分别为322.0h和438.6h。

 4．三种肟类化合物对中毒AChE恢复能力比较 从3种肟类活化剂对鲫鱼脑AChE和家兔脑AChE重活化能力比较来看：LUH­₆和TMB₄的重活化能力明显比2-PAM-Cl强，但LUH₆、TMB₄和2-PAM-Cl对小菜蛾等昆虫被辛硫磷抑制的AChE重活化能力比较并没有呈现较强规律性。

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