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大肠杆菌N-乙酰神经氨酸（1113-83-3）裂合酶基因的组成型高效表达
2014-08-11
来源：亚科官网
亚科科技股份和您一起探讨下大肠杆菌N-乙酰神经氨酸（1113-83-3）裂合酶基因的组成型高效表达：
临床上 ,炎性或恶性疾病的发生常伴随血清和其它体液中唾液酸含量的改变。酶法测定唾液酸具有特异、可靠和简便等优点。Ｎ 乙酰神经氨酸裂合酶 (ＮＰＬ ,ＥＣ4 1 3 3)是酶法测定唾液酸的关键酶[1 ] 。因此 ,ＮＰＬ对于炎性或恶性肿瘤的临床诊断具有重要意义。
本方法应用PCR技术从E .coliJM 10 5中扩增出长约 890bp的N 乙酰神经氨酸裂合酶基因 ,将其插入高表达载体 pET2 8a的NcoI/BamHI位点 ,转化E .coliBL2 1(DE3) ,构建高产N 乙酰神经氨酸裂合酶基因工程菌 ,其表达量占菌体总可溶性蛋白的 76 .8% ,活力比宿主菌均有不同程度的提高 ,其中 10 7号比宿主菌高 14倍。基因克隆结果导致N 乙酰神经氨酸裂合酶的表达由诱导型转变为组成型。
