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关于Tris缓冲液的知识你了解多少?
Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围,Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。Tris缓冲液在藻类培养基的配置过程中扮演pH稳定剂的角色,来实现藻类培养过程中pH的稳定性,本文将具体介绍一下关于的Tris缓冲液的相关知识。
Tris-HCl缓冲液优点
碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液;
对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
Tris-HCl缓冲液缺点
pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1
温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4
易吸收空气中的二氧化碳
对某些pH电极有一定干扰作用,要使用与Tris溶液具有兼容性的电极
除了Tris-HCl之外,tris还有多种衍生缓冲液:
TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等;
TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液;
TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA的碱基有保护性,常被用于DNA的稳定和储存;
TAE=Tris base+乙酸+EDTA,是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统;
TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,适用于长时间DNA电泳,对较小片段分离效果较好。
各种pH值的Tris缓冲液的配制
所需pH值(25℃) | 0.1mol/L HCl的体积 |
7.1 | 45.7 |
7.2 | 44.7 |
7.3 | 43.4 |
7.4 | 42.0 |
7.5 | 40.3 |
7.6 | 38.5 |
7.7 | 36.6 |
7.8 | 34.5 |
7.9 | 32.0 |
8.0 | 29.2 |
8.1 | 26.2 |
8.2 | 22.9 |
8.3 | 19.9 |
8.4 | 17.2 |
8.5 | 14.7 |
8.6 | 12.4 |
8.7 | 10.3 |
8.8 | 8.5 |
8.9 | 7.0 |
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积(单位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水将体积调至100ml。
温度对50mmol/L Tris-HCl液pH值的影响
4℃ | 25℃ | 37℃ |
8.1 | 7.5 | 7.2 |
8.2 | 7.6 | 7.3 |
8.3 | 7.7 | 7.4 |
8.4 | 7.8 | 7.5 |
8.5 | 7.9 | 7.6 |
8.6 | 8.0 | 7.7 |
8.7 | 8.1 | 7.8 |
8.8 | 8.2 | 7.9 |
8.9 | 8.3 | 8.0 |
9.0 | 8.4 | 8.1 |
9.1 | 8.5 | 8.2 |
9.2 | 8.6 | 8.3 |
9.3 | 8.7 | 8.4 |
9.4 | 8.8 | 8.5 |
相关链接:Tris缓冲液
本文由苏州亚科科技股份有限公司编辑