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BCA(2,2'- 联喹啉-4,4'-二甲酸二钠)作为显色剂的广泛应用
2020-03-31
来源:亚科官网
BCA,2,2'- 联喹啉-4,4'-二甲酸二钠盐,又称BCA-2Na,是测定蛋白质含量的一种常用试剂,CAS号为: 979-88-4。基于BCA显色反应的BCA检测法具有操作简单, 干扰物质少等特点,广泛用于分析化学、生物化学、医药卫生等领域。
BCA法原理:
是在碱性环境下蛋白质能与二价铜离子络合生成络合物, 同时将二价铜离子还原成亚铜离子。BCA钠盐与亚铜离子结合形成稳定的蓝紫色复合物, 在562 nm处有强的吸光度并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。
BCA试剂的配制:
BCA法检测通常包括BCA工作液,蛋白质标准液以及待测样品。
其中,BCA工作液由A液和B液混合而成。A液为1%BCA二钠盐 2%无水碳酸钠 0.16%柠檬酸三钠 0.4%氢氧化钠 0.95%碳酸氢钠混合调PH值至11.25。B液:4%的硫酸铜溶液。
标准蛋白溶液由牛血清白蛋白 (BSA) 根据其纯度用生理盐水配而成, 用于制作标准曲线。
BCA法应用实例:
根据有公开文献,BCA 法已用于测定血清和生物样品中的铜,用于检测药物中的地尔硫卓,和用于测定饮用水、茶叶、海带等的微量铜,此外,BCA法还用于测定大米、牛奶等食品中的蛋白质。
BCA法优点:
BCA 检测法是20世纪80年代中期研制的一种改进的Lowry测定法, 与传统Lowry法相比,BCA法具有操作简便、灵敏度高、变异系数小, 结果准确可靠、受干扰物质影响小等特点,在医学、生物学和食品领域应用广泛。
相关链接: 2,2'- 联喹啉-4,4'-二甲酸二钠(BCA)