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还原剂二硫苏糖醇(DTT)的性能及用途
2020-04-22
来源:亚科官网
二硫苏糖醇(Dithiothreitol,简称为DTT),外观为白色粉末,CAS号: 3483-12-3,是一种小分子有机还原剂,被广泛应用于细胞生物学、生物化学和生物医学应用领域。
二硫苏糖醇(DTT)是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。二硫苏糖醇对一个典型的二硫键的还原是由两步连续的巯基-二硫键交换反应所组成。二硫苏糖醇(DTT)的还原力受pH值的影响,只在pH值大于7的情况下能够发挥还原作用。这是因为只有脱去质子的硫醇盐负离子才具有反应活性,硫醇则没有,而巯基的pKa一般为8.3。
二硫苏糖醇(DTT)常用于还原蛋白分子和多肽的二硫键,通常作为蛋白质巯基保护剂,在疫苗制剂中用于防止蛋白半胱氨酸残基形成分子内和分子间的二硫键。在核酸检测过程中二硫苏糖醇(DTT)可破坏RNase蛋白质中的二硫键,使RNA酶变性,有助于如RNA建库,RNA扩增等实验的进行。二硫苏糖醇(DTT)还用于保护细胞和组织解毒剂,辐射防护剂等等。
不过,二硫苏糖醇(DTT)往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性。
值得说明的是,二硫苏糖醇(DTT)是一种有毒的物质,例如过渡金属存在时,二硫苏糖醇(DTT)会引起生物分子的氧化损伤,同时二硫苏糖醇(DTT)还可强化一些含砷和汞的化合物毒性。二硫苏糖醇(DTT)有刺鼻臭味,可因吸入、皮肤接触而危害健康,因此操作时要做好防护,戴好口罩、手套及护目镜,并在通风柜内操作。
相关链接:二硫苏糖醇(DTT)