影响蛋白酶K活性的因素有哪些？

蛋白酶K，是一种备受青睐的广谱蛋白酶，被认为是活性最高的蛋白酶。蛋白酶K具有出色的稳定性，在高温、高盐、较高的pH或一些常见抑制剂等条件下仍能保持较高活性，但这并不代表蛋白酶K的活性不受外界因素影响，本文将介绍影响蛋白酶K活性的因素。

蛋白酶K活性受pH的影响 

蛋白酶 K 在较广的pH范围（4?12.5)均有活性，但也受pH的影响。其催化活性在 pH 6-10范围内保持稳定，在pH 8-10内大幅增加。 在 pH 3.5-9.0，蛋白酶K分子的三维结构对 pH 的变化不敏感，但在过酸、过碱性环境中将发生不可逆变性。

 温度对蛋白酶K活力的影响

蛋白酶 K 在 20 ℃-60 ℃范围内保留超过 80 %的最高活性，在37 ℃时酶活力最大。 65 ℃保温10min-15min可部分失活，95 ℃加热 10 min，则会导致蛋白酶K完全失活。

Ca²⁺对蛋白酶 K 活力的影响

天然蛋白酶 K 结合着两个 Ca²⁺。去除 Ca²⁺会降低酶的热稳定性和一定程度的底物亲和力，但对酶的催化活性没有影响。 天然的和去除 Ca²⁺的蛋白酶 K 具有相似的结构性质； 蛋白酶 K 中的一些氢键和盐桥在维持两个Ca²⁺位点周围的构象上起关键作用。

激活剂和抑制剂对蛋白酶 K 活力的影响

在螯合剂 EDTA、 巯基试剂、 对氯汞苯甲酸 （PCMB）、N―甲苯磺酰―L―赖氨酰―氯甲基酮（TLCK）或 甲苯磺酰―苯丙氨酸氯甲基酮（TPCK）存在下，蛋白酶 K 仍可保持稳定和活力，而变性剂如尿素、SDS可提高它的催化活性。 不过，蛋白酶 K 属于丝氨酸蛋白酶类，其活力可被苯甲 基磺酰氟（PMSF）或二异丙基氟磷酸（DFP）抑制。

综上，pH、温度、Ca²⁺、激活剂和抑制剂等是影响蛋白酶 K 活力的主要因素。

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