TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）法检测谷胱甘肽

TMB，3,3',5,5'-四甲基联苯胺，一种高灵敏的重要体外诊断试剂，主要应用于酶联免疫吸附实验（ELISA)，免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。 

陈金阳，孙梦彤等人基于TMB建立了一种简单、快速且灵敏的谷胱甘肽分析方法，他们将壳聚糖溶液、H₂O₂溶液和TMB溶液混合反应，再向混合反应体系中分别加入不同浓度梯度的谷胱甘肽溶液继续反应，反应完成后通过紫外分光光度计测量溶液的吸光度，构建吸光度与谷胱甘肽浓度的线性关系，利用该线性关系即可快速地检测待测溶液中谷胱甘肽的浓度。也可以通过肉眼观察和相机拍照加入不同浓度梯度的谷胱甘肽后溶液的颜色，再利用Image J软件对拍照图片进行测定，获得不同溶液图片的红绿蓝颜色平均值，从而实现半定量地分析待测液中谷胱甘肽的浓度。

这种方法利用的原理是，壳聚糖具有类似于过氧化物酶的性质，在过氧化氢(H₂O₂)存在的条件下，催化TMB发生氧化反应生成蓝色的氧化态TMB(Ox-TMB)；当向壳聚糖、H₂O₂和TMB的混合溶液体系中加入一定量的谷胱甘肽后，谷胱甘肽会与Ox-TMB发生还原反应，使溶液的蓝色变浅，且变浅的程度与谷胱甘肽的浓度呈正相关关系，因此可以通过肉眼观察或相机拍照比较，建立一种快速、可视化的谷胱甘肽检测方法。

TMB相比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性，用于检测谷胱甘肽，对生物医学研究和临床医学检验等具有重要的应用价值。

相关链接： 3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）

参考文献：陈金阳、孙梦彤、王妤欣、库苠月、刘祥茹，一种谷胱甘肽的快速检测方法，CN110907446A