你知道吗，HEPES还应用在这些领域！

产品名称：4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)
英文名称：4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid(HEPES)
别名：N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸
分子式：C8H18N2O4S
CAS：7365-45-9
货号：Q0005
结构式：

HEPES简介

       4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一种重要的两性离子缓冲剂，其在pH为6.8～8.2的范围内具有良好的缓冲能力，能较长时间控制恒定的pH。使用浓度为10～50mmol/L，一般培养液内含20mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸即可具有良好的缓冲能力，且对细胞无毒性作用。

HEPES的应用

一、医药领域中的应用
      下面介绍一下HEPES作为伊立替康脂质体注射剂成分在医药领域中的应用。
       伊立替康脂质体（ONIVYDE）是一种无菌、白色至微黄色不透明等渗脂质体分散体，伊立替康脂质体注射剂用于治疗既往接受吉西他滨为基础的化疗药物治疗病情进展的胰腺转移性腺癌患者。脂质体是直径约110nm的单层磷脂双分子层小泡，磷脂双分子层包绕一个内水相，其中含有凝胶或沉淀状态的蔗糖盐形式的伊立替康。

伊立替康脂质体示意图
图片源于网络

       伊利替康脂质体成品是含5mg/ml三水合伊立替康（伊立替康蔗糖盐）活性物质的输注溶液的浓缩物，活性物质包裹在脂质体中。其他成分包括以下两部分：
    （1）以脂质体形式存在的脂质:1,2-二硬脂酰-SN-甘油-3-磷酸胆碱（DSPC），胆固醇，N-（羰基甲氧基聚乙二醇2000）（DSPE-MPEG2000）-1,2-二硬脂酰-SN-甘油-3-磷酸乙醇胺钠盐。
    （2）其他辅料:蔗糖八硫酸酯盐，HEPES缓冲液，氯化钠和注射用水。

       三水合物盐酸伊立替康以伊立替康蔗糖盐的形式存在于脂质体中。脂膜由DSPC、胆固醇和甲氧基封端的聚乙二醇(MW 2000)-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(MPEG-2000-DSPE)组成。脂质体分散在水缓冲溶液中。脂质体制剂包括：DSPC 6.81 mg/mL、胆固醇 2.22 mg/mL 和MPEG-2000-DSPE 0.12 mg/mL。每毫升还含有HEPES作为缓冲液4.05毫克/毫升和氯化钠作为等渗试剂8.42毫克/毫升。

二、化妆品领域中的应用
      HEPES可以平衡化妆品溶液中的偏酸性物质，作为活性剂，使产品抗衰老功效持续时间长；作为脱皮剂，软化角质，促进细胞新陈代谢；作为促透剂，促进化妆品中各种功效组分的透皮吸收。

化妆品示意图
图片源于网络

      CN110913830A 专利中介绍了一种基于短期和长期用于处理皱纹和细纹的化妆品组合物，组合物主要包括油相和多元醇相两部分组成，其中油相包括聚硅氧烷-11，聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷交联聚合物和十六烷基peg/ppg-10/1聚二甲基硅氧烷的混合物和透明质酸衍生物。多元醇相包括可溶性抗坏血酸，可溶性抗坏血酸葡萄糖苷，丙二醇，甘油和HEPES组成。

       HEPES经美国EWG（Environmental Working Group，环境工作组）评级为1,属绿色等级安全成分。对人体安全，无毒，生理兼容性佳，化学性能十分稳定。相比氮酮类促透剂，具有起效时间短、用量少、促透率高的特点。

三、检测试剂盒中的应用
       CN103149370B 专利中介绍了一种脂蛋白(a)检测试剂盒，该试剂盒包含试剂R1（HEPES缓冲体系）、试剂R2（聚苯乙烯胶乳颗粒混合物）和参考校准品3个部分。其中HEPES缓冲体系具体成分为：1.5g/L HEPES、9g/L氯化钠、0.2ml/L吐温-20、1g/L牛血清蛋白、10g/L聚乙二醇-6000、2.9g/L EDTA、0.9g/L Proclin300。标准配制下试剂R1为100mM HEPES缓冲液（pH7.5）。

脂蛋白(a)检测试剂盒示意图
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      CN114076741A 专利中介绍了一种甘胆酸检测试剂盒，该试剂盒包含试剂R1、试剂R2和校准品3个部分。其中试剂具体成分为：鼠抗甘胆酸单抗包被胶乳颗粒60-100mg/L，HEPES 0.01M-0.1M，硼酸-硼砂缓冲液0.01M-0.05M，封闭剂DB1130 5-20g/L，酪蛋白5-20g/L，表面活性剂5-20g/L，防腐剂0.7-1.5g/L，稳定剂50-100g/L。

      CN114047146A专利中介绍了一种磷脂酶A2检测试剂盒，该试剂盒包含试剂R1、试剂R2两个部分，其中R1试剂的组成为HEPES缓冲液、吐温(Tween)20、叠氮钠、氯化钠以及水。

四、细胞培养基中的应用
      CN102827804A专利中，介绍了HEPES在细胞培养基中应用，该培养基主要包含7部分组成，具体为：维生素、脂类、氨基酸、无机盐、蛋白水解物、缓冲成分和添加物。其中，缓冲成分为碳酸氢钠和HEPES。

细胞培养基示意图
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该专利有以下有益效果：
      1.该培养基使用常规方法制备，可支持Vero在方瓶、滚瓶上生长，并可支持Vero细胞微载体悬浮培养和微载体悬浮规模放大培养。另外也可以作为病毒维持液，实现病毒无血清生产。
      2.成本低廉，可实现规模化生产。

参考文献：
1、CN108366965B 稳定喜树碱药物组合物.
2、CN110913830A 对减少皱纹和细纹具有短期和长期益处的组合物.
3.1、CN103149370B 脂蛋白(a)检测试剂盒.
3.2、CN114076741A 一种甘胆酸检测试剂盒的制备方法.
3.3、CN114047146A 一种脂蛋白相关磷脂酶A2检测试剂盒的制备及检测方法.
4、CN102827804A  适用于Vero细胞微载体悬浮放大培养的培养基及方法.