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盐酸苄丝肼（14919-77-8）的测定—高效液相色谱法
2014-08-04
来源：亚科官网
方法名称： 盐酸苄丝肼的测定—高效液相色谱法
应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定盐酸苄丝肼的含量。
本方法适用盐酸苄丝肼。
方法原理： 供试品和内标均制成流动相溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长220nm处检测盐酸苄丝肼（C10H15N3O5·HCl）和内标盐酸多巴胺的吸收值，计算出其含量。
试剂： 1.甲醇
2.三氟乙酸
仪器设备： 1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按盐酸苄丝肼峰计算应不低于 1000，盐酸苄丝肼峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件
2.1 流动相：水 三氟乙酸+甲醇=1000 1 20
2.2 检测波长：220nm
2.3 柱温：室温
试样制备： 1. 称取供试品
取本品15mg，精密称定。
2. 内标溶液的制备
取盐酸多巴胺适量，加稀甲醇制成每1mL中约含有7mg的溶液，即得。
3. 供试品溶液的制备
上述供试品置50mL棕色量瓶中，精密加入内标液5mL，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
4. 对照品溶液的制备
精密称取盐酸苄丝肼对照品适量，与供试品同法配制。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤： 精密量取上述供试品溶液及对照品溶液10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长220nm处测定盐酸苄丝肼及盐酸多巴胺的吸收值，按内标法以峰面积计算，即得。
参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p513。
技术支持： 亚科化学试剂 http://www.yacoo.com.cn/
