1.甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐：
试剂配制：
（1）0.15mol/L Tris-双甘肽缓冲液：Tris 1.8171g，双甘肽793.2mg，加水至80mL溶解，用1 mol/L HCl调pH至8.6，再加水至100mL；
（2）2mmol/L底物溶液：9.6mg甘氨酰脯氨酸对硝基苯酰胺对甲苯磺酸盐（MW=482.5）溶于10mL Tris-双甘肽缓冲液中；
（3）标本：静脉采血5mL，及时分离血清，-20℃保存待测。
2.对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（PNP-NAG，用于糖尿病、肾功能检测）
底物液反应：以PNP-NAG为底物，在2.0ml的反应体系中，含0.1 mol/L NaAc-HAc缓冲液（pH5.2）,0.25mmol/L PNP-NAG，加入50μl酶液，混匀在37℃下反应10min，加入2.0ml 0.5 mol/L的NaOH终止反应后，于分光光度计上测定波长为405nm的光密度值，消光系数按1.73×104 mol/L·cm计算。（酶活力单位U定义：在上述条件下，每升溶液中每分钟释放1μmol NAG的量为1个酶活力单位。比活力定义：每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数。）
3.TOOS
反应试剂：4-AAP水溶液（10mM）；供氢体溶液（TOOS）（10mM）；过氧化氢溶液（0.45mM）；过氧化脲溶液（0.45mM）；尿素溶液 （0.1 mM, 0.2 mM，0.5 mM，1 mM，2 mM，5 mM，10mM）；过氧化物酶溶液（100U/ml），由过氧化物酶(280U/mg)制备，溶液应冷藏；血清；缓冲液由Good’s缓冲试剂和氢氧化钠溶液制备，缓冲试剂pH范围：NES pH 5.5-6.5，MOPS pH7.0，HEPES pH7.5-8.5，CAPS pH9.0-9.5。
尿素浓度对显色影响实验：2.5ml 0.1M的Good’s缓冲液（MOPS，pH7.0），0.1ml 10mM的4-AAP溶液，0.1ml 10mM的TOOS溶液，0.1ml 0.45mM的过氧化氢溶液，0.1ml的过氧化物酶溶液和0.1ml不同浓度的尿素溶液（0.1–10mM），37℃孵育10分钟。 测定产生的有色溶液的吸收光谱，并对比空白试剂。
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